Реферат Аналіз вдома

Страница 1 из 2 | Следующая страница

Аналіз вдома


Запровадження

Нині більшість діагностичних тестів з визначення стану здоров'я та перемоги виявлення захворювань людини виконується в лабораторіях спеціально навченим персоналом. Результати аналізів інтерпретуються вченими Франції таврачами-клиницистами й надалі йдуть на лікування пацієнта. До того лише незначну число важливих аналізів виконувалося у клініках і лікарняних палатах медичним чи обслуговуючого персоналу іврачами-клиницистами. Останні 50 років, і особливо у останнє десятиліття, спостерігається тенденція до розробки тестів, які б проводити аналіз вдома й без участі лікаря. Такі аналізи можуть бути виконані чи людиною, яка має узята проба, чи партнером. Отримані результати використовують із контролю стану здоров'я, передбачення критичних ситуацій або заради виявлення й контролю захворювань. Правильно інтерпретувати результати аналізу може або сам пацієнт, чи радник.Набори для аналізу дому повинні в аптеках чи надаватися лікарем.

Хоча переходу від аналізу, у лабораторії до аналізу вдома негаразд високі, як передбачали експерти, однак у 1984 р. загальна вартість наборів длясамодиагноза, проданих США через мережу, становить близько 240 млн. дол. Найпопулярніші набори визначення глюкози у крові та щоб виявити вагітності. Передбачається, що темпи зростання ринку збуту цієї продукції США становитимуть приблизно 20% на рік. Підвищення уваги споживача до свого здоров'я й побудувати нові технічні досягнення сприяли збільшення продажу наборів для діагностики вдома такою мірою, що у США лише визначення ранніх стадій вагітності пропонується більш 12 різних наборів. Останні 9 років понад 75 наборів для діагнозу вдома було розв'язано Управлінням контролю над якістю продуктів харчування, медикаментів і косметичні засоби. Можна припустити, що "нещодавно з'явився друком у продажу набір для передбачення овуляції ще більше збільшить обсяг продажу аналітичних систем длясамодиагностики. Принаймні подолання технічних труднощів діапазон і розмаїтість аналізів, які робити вдома, дедалі більш зростати.


1. Сфера застосування аналізів на дому

У принципі так набори для діагнозу вдома можна використовуватиме 1) контролю лікування діабету; 2) оцінки фертильності іфекундильности; 3) оцінки функції нирок й цирози печінки; 4) виявлення пухлин; 5) виявлення інфекційних захворювань; 6) виявлення алкоголізму

Для аналізу можна використовувати проби 1) сечі; 2) крові; 3) фекалій; 4) видихуваного повітря; 5) слини; 6) молока; 7)цервикально-вагинальной рідини; 8) сперми; 9) горлових мазків; 10)вагинальних мазків.

Найчастіше за домашніх умовах виникає у

1) тесті на вагітність, заснованому наиммунохимическом виявленніхорногоническогогонадотропина людини у сечі;

2)овуляционном тесті, заснованому наиммунохимическом виявленнілютеинизирующего гормону людини у сечі; 3) визначенні глюкози у крові чи сечі; 4) визначенні білків в сечі; 5) визначенні нітритів чиестеразной активності лейкоцитів як чинників, свідчить про інфекції сечового тракту.

Із перелічених тестів лише 2 виконуються методамииммуноанализа. Вочевидь, що види аналізів, які робити вдома, обмежені технічних можливостей, клінічної значимістю та соціальнійприемлемостью. Останній чинник утрудняє перехід від лабораторних аналізів до аналізам за домашніх умов з позицій як лікаря, і пацієнта. Мало хто пацієнти були б готові до самостійної постановці діагнозу, не отримавши схвалення лікаря. Наприклад, можна розробити домашній тест на захворювання, такі, як гонорея. Однак це можливість наштовхується на проблеми необхідності повідомлення про позитивному результаті, можливості хибних позитивних результатів і низької чутливості тесту під час аналізу необроблених проб. З іншого боку, наявність таких хвороб передбачає існування другого потенційного пацієнта – партнера. У зв'язку з наслідками позитивних результатів і необхідністю з'ясування потенційних контактів домашні тести зустрічають сильне заперечення із боку професійних медичних працівників. Отже, отримання врегулювання такі тести зіштовхнеться з великим опором і потенційний споживач це не матиме можливості придбати такий набір.


2 Розширення сфери застосування

>Набори для діагнозу вдома вже утвердилися у житті, у майбутньому можна очікувати подальшого збільшення їхньої кількості і розмаїття з допомогою прагнення споживачів наборів заощадити час і гроші, і навіть матимуть можливість самим ознайомитися з станом здоров'я. У домашніх умовах може вишукати застосування такі види аналізів:

1) контроль терапевтичних препаратів, наприкладтеофиллина;

2) виявлення стрептококів групи На гортані;

3) моніторинг фертильного періоду для оптимального застосуванняконцептических чиконтрацептических препаратів;

4) діагностика менопаузи;

5) діагностика венеричних захворювань;

6) діагностика простудних захворювань, і грипу;

7) виявлення раку молочної залози і матки;

8) діагностика серцево-судинних захворюванні.


3. Технічні вимоги

Ідеальна аналітична система для аналізу дому повинна 1) бути простий та легкій використання; 2) включати якнайменше стадій; 3) не вимагати точного дозування спроб і реагентів; 4) використовувати як проб легкодоступні рідини чи тканини організму; 5) давати легкоинтерпретируемий кінцевий результат; 6) включати застосування і дешевих приладів та інструментів або взагалі обходитися без них; 7) утримувати реагенти, стабільні протягом 1–2 років при кімнатної температурі.


4. Тести на вагітність і овуляцію

У наборах для аналізу домуиммуноанализ був уперше застосований у середині 1970-х років визначення ранніх стадій вагітності. Історія розвитку цього тесту є наочним прикладом застосування технічних нововведень з розробки простих аналізів, які працюють у принципу «так – немає». Тести для передбачення овуляції розроблено пізніше. Вони використовуються самі принципи, але потрібно реєструвати вже зміни кількості що визначається речовини.

4.1 Тест на вагітність

Конче важливо визначати вагітність у ранній стадії. Чим раніше жінка дізнається у тому, що вона вагітна, то раніше вона почне турбуватися про собі, й своє майбутнє дитині.

4.1.1 Біохімічні основи

Наявні у продажу в набори щоб виявити вагітності засновані на визначенні швидко зростаючого рівняhCG в сечі.hCG починаєпродуцироваться що розвиваютьсятрофобластами через 4–5 днів після запліднення яйцеклітини. Помітні кількостіhCG не виявляються сироватці чи сечі по крайнього заходу протягом 7 днів після запліднення, але моменту черговий очікуваної менструації концентрація гормону сягає 80 – 100ед./л.hCG єгликопротеином, структурногомологичним іншим гормонів такого типу.А-субъединици цих гормонів практично ідентичні, тоді як3-субъединици специфічні і зумовлюють їх біологічну активність.ГомологияJ-субъединицLH іhCG сягає 80%, проте />3-субъединицаhCG має додаткові 30 амінокислотних залишків наС-конце амінокислотною ланцюга.Антитела буде проти цієї частини />J-цепи або проти дві специфічніконформационнихепитопов, які виникають вчетвертичной структурі гормону, забезпечують специфічність визначенняhCG.Специфичность будь-якогоиммуноанализа залежить від характеристикантисиворотки. Найперші тести на вагітність виникли на аглютинації.Эритроцити зсорбированнимhCGинкубировали з антитілами і зразком сечі. За відсутностіhCG еритроцитиагглютинировали. Якщо ж у сечі перебувало достатньоhCG, то аглютинації клітин було. Наступні модифікації тесту включали використання частинок зсорбированними антитілами, які у присутності гормону утворювали осад. Проте інтерпретувати результати модифікованих тестів дуже важко. Понад те, на результати таких тестів впливали механічні впливу, а проведення аналізу вимагали від 1 до 2 год.

>Поликлональние антитіла, застосовувані до цього часу тестах на вагітність, незмінно давали перехресні реакції зLH, наявних у сечі жінки, тому з допомогою цих тестів можна було надійно визначати лише високі концентраціїhCG. З іншого боку,аффинность; специфічністьполиклональнихантисивороток і змістом специфічних антитіл у яких змінювалися від партії до партії, у межах. Розвитокгибридомной технології отримання моноклональних антитіл дозволило вирішити ті проблеми, пов'язані з специфічністю і непостійністю властивостейантисивороток. На базі моноклональних антитіл з'явилася можливість створення високочутливих тестів за використанням як конкурентних, а й прямих «сандвіч» – методів.

Кілька років тому у продажу в з'явився набір щоб виявити вагітність із допомогоюиммуноанализа начастичкахзолей. У тесті використовується розчин колоїдного золота, червоний колір якого змінюється від і при зв'язуванні антитіл. Якщо частинки, у якихсорбировани антитіла доhCG, інкубувати з пробою, що містить гормон, то мері їх агрегаціїкрасно-малиновая забарвлення за тридцяти хв поступово зникає. При змісті гормону більш 150ед./л малинова забарвлення перетворюється на сіру. Останній модифікації цього аналіз проводиться на твердих носіях –дипстиках.Антитела одного типу пов'язані зполистирольнимдипстиком, а другого –сорбировани начастичках золота.Инкубациядипстика з пробою сечі і міченим частинками золота реагентом призводить до утворення рожевою забарвлення надипстике, тоді як пробі лежить досить багатоhCG.

Убольшинс>тве наборів щоб виявити вагітності, наявних у зараз у продажу, використовуються методи типуELISA, вперше достойні роботі. Цей метод став активно використовуватися в наборах для аналізу дому після появигибридомной технології, яка дозволяє отримувати багато специфічні,високоаффинние моноклональні антитіла. У багатьох із цих методів застосовуютьдипстики, які мають антитіла одного типу, іконъюгати антитіл другого типу з ферментом як мітки. Мембрани можуть бути виготовлені як смужок з полістиролу або з спеціального документа на пластикової підкладці. Якщо міткою є лужнефосфатаза, то використовують кольорову реакцію з субстратом, наприклад5-бром-4-хлор-3-индолил-фосфатом, у яких на твердої фазі утворюється нерозчинний продукт блакитного кольору. Що стосується пероксидази хрону, зазвичай, застосовують кольорові реакції в розчині.

У ці методи досягається чутливість близько 50ед./л, що відповідає концентраціїhCG в останній момент очікуваної менструації. Перевага методів типуELISA полягає у високої чутливість проблеми та однозначності результату аналізу. Як приклад на рис. 1 зображений набірClearblue™. Але тут дано стисле опис принципу дії набору.


>Clearblue™ єдиний набором, у якому максимально спрощений навіть відбір проб, проте реагенти поставляються як готові до вживання розчинів. У набір входять спеціальні стрижні, на наконечниках якихсорбировани моноклональні антитіла протиS-субъединициhCG. Спеціальний ковпачок закриває наконечник. Разом вони утворюють оригінальне пристрій для відбору проб. При запровадження цього влаштування у потік сечі відбувається відбір необхідної кількості проби. ВесьhCG в пробі пов'язують із антитілами. Після цього ковпачок знімають, наконечник промивають під струменем води та вміщують у лунку з антитіламианти-hCG,конъюгированними зі лужноїфосфатазой. Якщо пробі міститьсяhCG, токонъюгат антитіло – фермент також пов'язується лежить на поверхні наконечника. Далі наконечник промивають і поміщають на другу лунку, що міститьБХИФ. За наявності сечіhCG внаслідок освіти похідного індиго лежить на поверхні твердої фази з'являється блакитна забарвлення.

Усі розчини перебувають у одному блоці, а процесі проведення аналізу не потрібно в перенесення проб сечі. Для отримання результату за тридцяти хв жінці потрібна лише водогінна вода.

Останніми роками в методі типуELISA застосовуютьмикропористие мембрани.Микропористие мембрани дозволяють скоротити час аналізу до 5 хв завдяки високої концентрації антитіл і великий величині відносини площі поверхні обсягу, у результаті різко знижується рольдиффузионного чинника у взаємодії реагентів. Інакше кажучи, короткий дифузний шлях забезпечує швидке зв'язування імунохімічних реагентів з твердої фазою. З іншого боку, у присутності надлишку реагентів реакція зв'язування протікає попсевдопервому порядку. Можливо, що у недалекому майбутньому такі методи використовуватимуть в наборах для діагнозу вдома. Методи змикропористими мембранами вигідно відрізняються дуже малій тривалістю аналізу та можливістю використання позитивного контролю, як, наприклад, у традиційному наборіAbbottTestpack™. До вад таких методів ставляться їхмногостадийность й необхідність додавання певної кількості реагентів з допомогою піпетки.

4.2 >Овуляционние тести

Після із розробкою та виробництвомиммуноаналитических наборів визначення вагітності вдома розробили різні варіантиELISA й у визначення зміни рівняLH в сечі із єдиною метою передбачення овуляції.

4.2.1 Клінічні і біохімічні основи

Від однієї шостої до десятої всіх подружніх пар звертаються його до лікаря у зв'язку з проблемоюсубфертильности.Субфертильность можна з'ясувати, як нездатність завагітніти після року нормальної статевого життя не залучаючи протизаплідних коштів. Причинисубфертильности можуть бути різними, але ймовірність запліднення можна істотно підвищити з допомогою визначення фертильного періоду.

До того єдиними домашніми методами визначення фертильного періоду жіночого циклу були реєстрація зміни температурибазального тільця чи зміни еластичності і обсягушеечной слизу. Обидва ці методу показують, що овуляція може відбутися або вже відбулася, але дуже ненадійні у різних фізіологічних і патологічних ситуаціях. Якщо зазначені методи використовуються правильно і довго, то шанси виникнення вагітності можуть збільшитися. Теоретично, можна показати, що вибір оптимального моменту для статевого акта підвищить ймовірність вагітності. Критичним подією, попереднім овуляції, є викид до кровіLH. Цей процес відбувається можна використовуватиме розподілуовариалиюго циклу нафолликулярную ілютеальную фази. Під часфолликулярной фазиLH іFSH вивільняються з гіпофізу потроху і стимулюють дозрівання трьох-чотирьох фолікулів всередині яєчника. Згодом одне із фолікулів домінує й починаєсекретировать дедалі більші кількості естрогену. Після досягнення короткий час певного рівня естрогену у крові через позитивну зворотний зв'язку згипоталамусом різко зростає секреціяLH. СекреціяLH у середині циклу стимулює розривфолликулярних мембран і звільнення дозрілогоооцита. Вважають, що яйцеклітина здатна до запліднення протягом 12–14 год, а сперматозоїди залишаються життєздатними у жіночомувоспроизводительном тракті по крайнього заходу протягом 3 днів. Після секреціїLH жінка потенційнофертильна протягом 1–2 днів. Під часлютеальной фази циклу порожні фолікули утворюють структуру, звану corpusluteum, якасекретирует прогестерон і естроген. Якщо запліднення сталося, то зародок імплантується вендометрий і секреція прогестерону триває протягом 12 тижнів. Якщо яйцеклітина не запліднено, то corpusluteum розпадається, і рівеньциркулирующего прогестерону падає. Тодіендометрий руйнується, і розпочинається новий менструальний цикл. Перший день менструального кровотечі вважатимуться початком нового циклу.

Починати визначенняLH в сечі слід, узгоджуючи з тривалістю і особливостями менструального циклу. Бажано починати аналіз за 2–3 дні очікуваної овуляції, що при жінок із нормальним циклом настає через 12–16 днів після менструації. Дата початку тестування має бути дорівнює тривалості циклу мінус 17. Що стосується нерегулярних циклів визначення початковій дати необхідно брати час найбільш короткого циклу. Вочевидь, що через проблеми, що з обчисленням тривалості менструального циклу, нерегулярністюовариальних циклів, і навіть необхідністю отримання достовірної базової лінії, результатів тестування будуть тим надійніше, що буде проведено аналізів.

Два останніх роки розроблено кілька наборів визначення часу овуляції вдома й у клініках. За винятком наборуDiscretest™, який грунтується на методіSPIA, в інших наборах застосовуються методи типуELISA. До основних рис цих наборів наведені у табл. 1.

Таблиця 1. Порівняльні характеристики наборів длясамодиагноза, які у Великій Британії та

Страница 1 из 2 | Следующая страница

Схожі реферати:

Навігація